骨形态发生蛋白诱导基因克隆和表达的实验研究

• 作者: 张彩莲 李丹 李立文 胡蕴玉
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 骨形态发生蛋白质类 基因 遗传学技术
• 年，卷（期）: 2004,（8）
• 所属期刊栏目: 组织工程相关基础研究
• 页码范围: 1446-1447
• 页数: 3页
• 分类号: R318
• 字数: 3957字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2004.08.019

摘要

目的:用基因工程技术在大肠杆菌中表达骨形态发生蛋白诱导基因(BMP-2-induced gene 3 kb gene, BIG-3)所编码的蛋白.方法:依据 Genbank中 BIG-3的基因序列设计并合成引物,从新生小鼠颅骨组织中提取总 RNA,通过反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)得到 BIG-3全长编码序列.将所得到的基因片段克隆至原核表达载体 pGEX-4T-2的多克隆位点获得 pGEX-4T-2-BIG-3重组表达载体,经测序证实后转化大肠杆菌 BL21(DE3)菌株,挑选阳性克隆,经诱导表达后 SDS-PAGE鉴定.结果:克隆得到 BIG-3全长编码序列并在大肠杆菌中表达了 GST-BIG-3融合蛋白,融合蛋白约占菌体总蛋白的 45.3%.结论:通过 RT-PCR从新生小鼠颅骨中克隆到 BIG-3基因并在大肠杆菌中获得 GST-BIG-3融合蛋白的高水平诱导表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李丹	解放军第四军医大学西京医院骨科研究所	139	662	13.0	21.0
2	胡蕴玉	解放军第四军医大学西京医院骨科研究所	45	440	13.0	19.0
3	张彩莲	延安大学医学院附属医院呼吸内科	35	309	9.0	16.0
4	李立文	解放军第四军医大学西京医院骨科研究所	3	16	2.0	3.0