人胰岛素样生长因子-1基因转染对软骨细胞增殖的影响

• 作者: 刘尚礼 崔力扬 沈慧勇 郑召民 黄东生 黄宗强 黄建荣
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 软骨细胞 生长调节素类 腺病毒,人
• 年，卷（期）: 2004,（26）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 5723-5725
• 页数: 3页
• 分类号: R349.8
• 字数: 1448字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2004.26.029

摘要

背景:各种生长因子对体外培养的软骨细胞均有不同程度的促增值作用,但半衰期较短,很难达到软骨缺陷治疗所要求的时效.目的:探讨自行构建携带人胰岛素样生长因子腺病毒载体(Ad/CMV-hIGF-1)对软骨细胞增殖的影响.设计:设立对照的实验研究.地点和对象:实验在中山大学林百欣医学研究中心进行.体外培养人胚胎软骨细胞,采用对数增长期的第3代软骨细胞进行实验.干预:自行构建携带hIGF-1基因的重组腺病毒并进行PCR,Western blot 鉴定.采用1,10,100及500不同感染复数单位(multiplicity of infection,MOI)的Ad/CMV-hIGF-1分别转染第3代软骨细胞,用磷酸盐(PBS)做阴性对照,hIGF-1生长因子(100μg/L)做阳性对照.主要观察指标:采用四氮甲基唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测不同时间、不同组别软骨细胞吸光度.结果:第2代重组腺病毒上清液中PCR鉴定含有hIGF-1基因,Western blot证实Ad/CMV-hIGF-1表达成熟的hIGF-1生长因子.不同病毒滴度转染对软骨细胞增殖的影响存在量效依赖关系,在1～100 MOI之间,软骨细胞吸光度随着病毒滴度增加逐渐升高,100 MOI软骨细胞吸光度约为PBS组的3倍;500 MOI Ad/CMV-hIGF-1时,软骨细胞吸光度较100 MOI下降,与1 MOI与10 MOI对软骨细胞增殖的影响近似.PBS组随着细胞体外培养时间延长,细胞增殖下降,hIGF-1生长因子、hIGF-1基因对软骨细胞增殖的影响存在时效关系,72 h达到峰值.结论:成功构建Ad/CMV-hIGF-1;Ad/CMV-hIGF-1基因转染对软骨细胞增殖的影响存在量效、时效依赖关系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘尚礼	中山大学附属第二医院骨科	207	1649	19.0	31.0
2	黄东生	中山大学附属第二医院骨科	128	832	15.0	21.0
3	沈慧勇	中山大学附属第二医院骨科	99	805	14.0	21.0
4	郑召民	中山大学附属第二医院骨科	138	1705	22.0	35.0
5	黄建荣	中山大学附属第二医院骨科	87	757	16.0	23.0
6	黄宗强	中山大学附属第二医院骨科	5	52	3.0	5.0
7	崔力扬	中山大学附属第二医院骨科	5	34	3.0	5.0