摘要:
目的:证明大鼠脑缺血后树突状细胞(dendritic cell,DC)是否参与脑损伤过程和所具有的免疫活性.方法:用线栓方法封闭大鼠右侧大脑中动脉制作动物模型.用免疫组化染色方法检测脑缺血1 h到第6天时,缺血脑组织中DC(OX62+)的存在,以及胶质细胞/巨噬细胞(OX42+)转化成DC(OX62+)的情况.同时检测活化后的DC样细胞表达MHC-Ⅱ类分子的水平.结合免疫组化和寡核苷酸探针杂交方法,检测DC样细胞的功能.结果:缺血脑半球和假手术的脑半球相比较,在1 h DC的数量明显增加(t=7.143,P<0.001).在脑缺血组中,缺血脑半球与非缺血脑半球相比较,DC的数量也增多(t=10.295,P<0.001).脑缺血第6天,缺血组与假手术组进行比较,DC表达MHC-Ⅱ类分子(OX62+OX6+)显著升高(t=2.975,P<0.05).缺血脑半球与非缺血脑半球相比较,在12,24和48 h,DC表达白介素-6(interleukin-6,IL-6)mRNA,P值均<0.05,而DC表达白介素-10(interleukin-10,IL-10)mRNA在12 h时,t=11.258,P<0.01,24 h时,t=12.124,P<0.001.脑缺血1 h到第6天,缺血脑半球与非缺血脑半球相比较,DC表达肿瘤坏死因子-α(tumornecroticfactor-α,TNF-α)mRNA有两个-α,TNF-α)mRNA有两个2.696,P<0.05)和12 h(t=4.793,P<0.01),第二个高峰期是在48 h(t=3.072,P<0.05)和第6天(t=2.715,P<0.05).脑缺血后,DC表达干扰素-γ(interferon-,IFN-γ)mRNA是随着脑缺血时间延长,IFN-γ表达量增加,24h时,t=2.677,P<0.05,48 h时,t=2.896,P<0.05,第6天,t=6.145,P<0.001.结论:脑缺血后,脑缺血组织中DC数量的增加,提示DC参与了脑缺血过程.DC不仅在脑损伤过程中处于活化状态,而且通过DC表达的细胞因子产生免疫效应.