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摘要:
目的:克隆、表达 SVV基因,并探讨其在肿瘤预后中的作用.方法 :从人白血病细胞系 HL60提取总 RNA,用 RT-PCR方法扩增出 SVV基因片段.将 SVV基因片段插入载体 pGEM-T Easy中,经全自动序列分析仪测序正确后用 NdeⅠ/ XhoⅠ双酶切,亚克隆到原核表达载体 pRSET-C中,构建重组表达载体 pRSET-c-SVV,并转化大肠杆菌 BL21菌株.取工程菌,经 IPTG诱导表达,对表达产物进行 SDS-PAGE鉴定并初步纯化.结果 :经 RT-PCR,测序和酶切鉴定,成功地克隆了人 SVV基因;经 IPTG诱导的重组质粒 pRSET-C-SVV表达出相对分子质量约为 16 500 u的蛋白,与预期的结果相符.结论 :成功克隆了人肿瘤细胞的抗凋亡基因 SVV,并在大肠杆菌 BL21中表达出 SVV蛋白.该基因的高效表达为进一步探讨以 SVV为基础的肿瘤的防治及预后判断提供工具.
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文献信息
篇名 凋亡抑制基因Survivin的表达在肿瘤预后评估中的作用
来源期刊 中国临床康复 学科 医学
关键词 肿瘤,实验性 克隆 ,分子 基因表达 预后
年,卷(期) 2004,(8) 所属期刊栏目 肿瘤及慢性疼痛相关基础研究
研究方向 页码范围 1494-1495
页数 3页 分类号 R73
字数 3893字 语种 中文
DOI 10.3321/j.issn:1673-8225.2004.08.057
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 张惠中 解放军第四军医大学唐都医院中心实验室 6 31 2.0 5.0
2 张盈华 解放军第四军医大学唐都医院中心实验室 3 11 2.0 3.0
3 侯毅鞠 解放军第四军医大学唐都医院中心实验室 2 9 2.0 2.0
4 邹爱民 解放军第四军医大学唐都医院中心实验室 2 9 2.0 2.0
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克隆 ,分子
基因表达
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中国组织工程研究
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21-1581/R
大16开
沈阳浑南新区10002信箱
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1997
chi
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