温度敏感型基因永生化神经前体细胞系的建立

• 作者: 兰兰 张海燕 徐群渊 段德义 王蓓蓓 苏玉金 赵咏梅 赵春礼
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 医学
• 关键词: SV40温度敏感突变体 神经前体细胞 永生化 体外培养 免疫细胞化学 大鼠
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 491-497
• 页数: 7页
• 分类号: Q189|R322.81
• 字数: 6125字
• 语种: 英文
• DOI: 10.3321/j.issn:0529-1356.2005.05.008

摘要

目的建立温度敏感型永生化神经前体细胞系,鉴定其细胞生长特点及表达抗原的特性. 方法利用逆转录病毒感染原代培养的胚胎13d SD大鼠中脑神经前体细胞,建立温度敏感型永生化神经前体细胞系RMN,利用免疫细胞化学、Western blot和流式细胞分析方法测定RMN细胞的特征. 结果在33℃条件下,RMN细胞呈多边形,有较短突起;细胞增殖迅速,群体倍增时间为48 h,可连续传代和冷冻保存;细胞表达SV40大T抗原,nestin蛋白和Nurrl蛋白;RMN细胞中未发现染色体倍体的异常,裸鼠接种20周后未观察到肿瘤的形成.在39℃条件下,RMN细胞增殖速度减缓,细胞形成较长突起.在含1%胎牛血清的培养基中培养1周后,RMN细胞可表达β-Ⅲ-tubulin,GFAP和Gal C等抗原,但SV40抗原表达减弱.结论RMN细胞系是SV40/tsA58基因永生化的大鼠神经前体细胞系,是具有温度敏感性及多分化潜能的前体细胞系.