人细胞间黏附分子1cDNA的克隆及表达载体的构建

• 作者: 何艳 苏先狮 蒋永芳 陈军
• 来源期刊: 中国医师杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 人细胞间黏附分子-1 RT-PCR 基因克隆 序列分析
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 617-619
• 页数: 3页
• 分类号: Q81
• 字数: 3107字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1008-1372.2005.05.016

摘要

目的构建人细胞间黏附分子-1真核表达重组体pcDNA3.1hisB-ICAM-1.方法设计、合成ICAM-1基因序列特异性引物,从肝癌组织中提取总RNA,以此为模板经RT-PCR扩增人ICAM-1的cDNA片段;然后将其克隆到pGEM-T Easy Vector,构建中介重组体(pGEM- ICAM-1),再克隆,构建真核表达重组体pcDNA3.1HisB - ICAM-1,经菌落PCR和限制性酶切有目的片段出现,进行DNA序列分析.结果 RT-PCR扩增得到人成熟ICAM-1的cDNA片段大小为1622bp,中介重组体(pGEM- ICAM-1),酶切后与真核表达载体连接,根据酶切鉴定和DNA序列分析得到真核表达重组体pcDNA3.1HisB - ICAM-1;结论:成功构建了真核表达重组体pcDNA3.1HisB-ICAM-1.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何艳	中南大学湘雅二医院肝病研究中心	58	248	10.0	13.0
2	陈军	中南大学湘雅二医院肝病研究中心	93	550	11.0	20.0
3	蒋永芳	中南大学湘雅二医院肝病研究中心	66	266	8.0	13.0
4	苏先狮	中南大学湘雅二医院肝病研究中心	48	123	5.0	9.0