除草剂靶酶-AHAS酶及基因突变体与除草剂设计(I).野生型和突变型E.coli AHAS II酶动力学性质的系统研究

• 作者: 席真 李庆霞 欧阳砥 牛聪伟 班树荣
• 来源期刊: 农药学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 乙酰乳酸合成酶 乙酰羟基酸合成酶 定点突变 突变体 酶的动力学
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 215-220
• 页数: 6页
• 分类号: Q946.5
• 字数: 4009字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1008-7303.2005.03.004

摘要

针对除草剂敏感型乙酰羟基酸合成酶E. coli AHAS II的抗性域,引入W464A、W464F、W464L、W464Y点突变.采用Megaprimer PCR定点突变,测序鉴定,构建了4个E. coli AHAS IIW464位点的突变体.通过对E. coli AHAS II野生型及突变体动力学性质的测定,发现它们对于底物-丙酮酸及3种辅助因子(FAD、ThDP、Mg2+)有着不同的特征常数.这些部分抗性酶系的建立以及对动力学性质的系统研究,为探讨AHAS酶对农药分子抗性的作用机制、设计合成新除草剂及其筛选体系提供了基础.