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摘要:
目的构建MMP-9反义RNA真核表达载体.方法提取胃癌组织总RNA,按照GenBank中检索的MMP-9基因cDNA序列,设计并合成反义MMP-9基因片段引物,进行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),先将扩增产物克隆至pGEM-T载体,再将其反向亚克隆到真核表达质粒pcDNA3.1中,然后对阳性克隆进行酶切鉴定和测序分析.结果 PCR扩增出的反义片段与预期长度相符.构建的MMP-9反义RNA表达质粒pcDNA3.1-MMP-9分别作PCR及双酶切(BamHⅠ和HindⅢ)鉴定,证实其中有目的片段完整插入,插入片段测序结果与反义MMP-9序列设计完全一致.结论成功构建了MMP-9反义RNA真核表达载体pcDNA3.1-MMP-9,为进一步研究MMP-9蛋白分子的生物学功能和以MMP-9为靶点的恶性肿瘤的基因治疗研究奠定了基础.
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内容分析
关键词云
关键词热度
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文献信息
篇名 MMP-9反义RNA真核表达载体的构建及鉴定
来源期刊 山东医药 学科 医学
关键词 MMP-9 表达载体 反义 基因克隆
年,卷(期) 2005,(16) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 13-14
页数 2页 分类号 R735.2
字数 1830字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1002-266X.2005.16.006
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 张云汉 郑州大学第一附属医院 77 279 9.0 10.0
2 陈奎生 郑州大学第一附属医院 184 628 11.0 15.0
3 高冬玲 郑州大学第一附属医院 66 194 7.0 10.0
4 张岚 郑州大学第一附属医院 53 137 6.0 8.0
5 唐琳 5 12 1.0 3.0
传播情况
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研究主题发展历程
节点文献
MMP-9
表达载体
反义
基因克隆
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
山东医药
周刊
1002-266X
37-1156/R
大16开
济南市燕东新路6号
24-8
1957
chi
出版文献量(篇)
55362
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42
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