MMP-9反义RNA真核表达载体的构建及鉴定

• 作者: 唐琳 张云汉 张岚 陈奎生 高冬玲
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: MMP-9 表达载体 反义 基因克隆
• 年，卷（期）: 2005,（16）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 13-14
• 页数: 2页
• 分类号: R735.2
• 字数: 1830字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2005.16.006

摘要

目的构建MMP-9反义RNA真核表达载体.方法提取胃癌组织总RNA,按照GenBank中检索的MMP-9基因cDNA序列,设计并合成反义MMP-9基因片段引物,进行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),先将扩增产物克隆至pGEM-T载体,再将其反向亚克隆到真核表达质粒pcDNA3.1中,然后对阳性克隆进行酶切鉴定和测序分析.结果 PCR扩增出的反义片段与预期长度相符.构建的MMP-9反义RNA表达质粒pcDNA3.1-MMP-9分别作PCR及双酶切(BamHⅠ和HindⅢ)鉴定,证实其中有目的片段完整插入,插入片段测序结果与反义MMP-9序列设计完全一致.结论成功构建了MMP-9反义RNA真核表达载体pcDNA3.1-MMP-9,为进一步研究MMP-9蛋白分子的生物学功能和以MMP-9为靶点的恶性肿瘤的基因治疗研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张云汉	郑州大学第一附属医院	77	279	9.0	10.0
2	陈奎生	郑州大学第一附属医院	184	628	11.0	15.0
3	高冬玲	郑州大学第一附属医院	66	194	7.0	10.0
4	张岚	郑州大学第一附属医院	53	137	6.0	8.0
5	唐琳		5	12	1.0	3.0