RNA干扰技术抑制内源性绿色荧光蛋白的表达

• 作者: 唐霓 张娟 闫歌 陈娟 陈维贤 黄爱龙
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: RNA干扰 绿色荧光蛋白 短发夹状RNA
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 65-68,87
• 页数: 5页
• 分类号: Q51
• 字数: 3370字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-5464.2005.06.015

摘要

目的建立稳定表达绿色荧光蛋白(GFP)的细胞株;构建短发夹RNA(shRNA)表达质粒并观察其对内源性GFP的抑制作用.方法转染pEGFP-N1至HepG2细胞,利用G418筛选获得稳定表达GFP的细胞株(HepG2.GFP);设计合成针对GFP基因的siRNA对应的DNA片段,插入转录载体pTZU6+1,构建shRNA表达载体pSHGFP,转染HepG2.GFP,荧光显微镜观察细胞荧光强度,以western blot检测GFP蛋白水平,以RT-PCR检测mRNA水平.结果利用PCR方法从HepG2.GFP细胞基因组DNA中检测到GFP基因;pSHGFP能够显著抑制该细胞中GFP的表达.结论GFP基因成功整合至HepG2细胞基因组中,pSHGFP能够显著抑制内源性GFP的表达,该系统能够用于RNA干扰机制等研究中.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张娟	重庆医科大学病毒性肝炎研究所感染性疾病重点实验室	21	47	3.0	6.0
2	闫歌	重庆医科大学病毒性肝炎研究所感染性疾病重点实验室	13	179	7.0	13.0
3	唐霓	重庆医科大学病毒性肝炎研究所感染性疾病重点实验室	59	385	10.0	17.0
4	黄爱龙	重庆医科大学病毒性肝炎研究所感染性疾病重点实验室	236	1190	16.0	23.0
5	陈维贤	重庆医科大学病毒性肝炎研究所感染性疾病重点实验室	74	348	11.0	15.0
6	陈娟	重庆医科大学病毒性肝炎研究所感染性疾病重点实验室	35	122	7.0	8.0