农杆菌介导高羊茅遗传转化体系的建立

• 作者: 吴关庭 夏英武 王伏林 胡张华 郎春秀 金卫 陈笑芸 陈锦清
• 来源期刊: 核农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 高羊茅 农杆菌 遗传转化 影响因素 筛选效果
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 植物诱变育种·农业生物技术
• 页码范围: 340-346
• 页数: 7页
• 分类号: S5
• 字数: 5924字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-8551.2005.05.004

摘要

为建立农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导高羊茅(Festuca arundinacea Schreb.)遗传转化体系,以草坪型高羊茅品种凌志的胚性愈伤组织为受体材料,通过gus基因瞬时表达检测,研究了多种因素对农杆菌介导转化的影响.结果表明,农杆菌介导高羊茅胚性愈伤组织转化的适宜条件为:愈伤组织在含BAP和NAA各0.5mg/L的培养基上预培养3d;菌液浓度OD600值0.7,感染时间15min;农杆菌预培养基和悬浮培养基以及共培养基中添加100μmol/L的乙酰丁香酮;共培养温度23℃,共培养时间3d,共培养基pH值5.2.不同浓度潮霉素筛选效果试验表明,采用低浓度(50mg/L)潮霉素连续筛选,再生获得的转基因植株数最多,因此是最为可取的筛选方式.