含人β-内啡呔融合基因的腺病毒/腺相关杂合病毒载体的构建与鉴定

• 作者: 俞卫锋 吴飞翔 徐学武 李泉 王星华 董刚
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: β-内啡呔 腺病毒 腺相关病毒 杂合病毒 构建 鉴定
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 6-8
• 页数: 3页
• 分类号: Q71
• 字数: 2245字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2005.04.003

摘要

目的:构建含人β-内啡呔融合基因的腺病毒/腺相关杂合病毒.方法:构建腺病毒穿梭质粒pDC312-DTREE,与骨架质粒共转染HEK293细胞,细胞内同源重组包装出腺病毒/腺相关杂合病毒.PCR法鉴定病毒及TCID50法测定病毒滴度.杂合病毒感染NIH3T3细胞观察转基因的表达,ELISA法测定表达产物浓度.结果:穿梭质粒pDC312-DTREE经限制性核酸内切酶AatⅡ及NotⅠ酶切结果正确.PCR鉴定结果表明病毒DNA内有人β-内啡呔DNA序列,且无野生型病毒的污染,病毒滴度为1.29×10 10 PFU/ml.病毒感染细胞后第3d,细胞培养液内有高浓度的β-内啡呔.结论:成功构建了含人β-内啡呔融合基因的腺病毒/腺相关杂合病毒,为进行下游相关研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	俞卫锋	第二军医大学东方肝胆外科医院麻醉科	123	593	12.0	18.0
2	李泉	第二军医大学东方肝胆外科医院麻醉科	38	290	8.0	16.0
3	徐学武	第二军医大学东方肝胆外科医院麻醉科	14	54	4.0	6.0
4	吴飞翔	第二军医大学东方肝胆外科医院麻醉科	20	50	3.0	6.0
5	王星华	第二军医大学东方肝胆外科医院病毒基因治疗实验室	7	18	2.0	4.0
6	董刚	第二军医大学东方肝胆外科医院麻醉科	2	2	1.0	1.0