日本血吸虫磷酸甘油酸激酶基因T/A克隆及序列分析

• 作者: 伍和平 刘传爱 廖力 张愉快 杨秋林 梁瑜 肖建华
• 来源期刊: 中国寄生虫病防治杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 血吸虫,日本 磷酸甘油酸激酶 T/A克隆 序列分析 RT-PCR
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 203-205
• 页数: 3页
• 分类号: R383.24
• 字数: 2314字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-5234.2005.03.014

摘要

目的获取日本血吸虫磷酸甘油酸激酶(SjPGK)编码基因片段,分析其核苷酸序列,为日本血吸虫病疫苗研制提供候选抗原分子.方法根据曼氏血吸虫磷酸甘油酸激酶(SmPGK) cDNA 序列设计1对引物,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,从日本血吸虫成虫总RNA中扩增 SjPGK 基因片段.利用T/A克隆法,将其克隆入 pMD18-T 载体,经双酶切分析和 PCR 鉴定,将阳性克隆进行脱氧核糖核酸序列测定;运用Blast程序,将测序结果及其推导的编码氨基酸序列与NCBI 数据库在核苷酸水平和氨基酸水平进行同源性比较.结果 RT-PCR 特异性扩增出1条长约830 bp大小的条带;经酶切和PCR鉴定表明所构建的质粒pMD18-T-SjPGK中含有所扩增的基因序列;脱氧核糖核酸序列测定和分析,SjPGK 基因片段长为830 bp,与 SmPGK 的核苷酸同源性为85%,分值为 672;氨基酸同源性为94%,分值为473.结论成功克隆SjPGK 编码基因片段,为进一步实验提供了条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨秋林	南华大学医学院寄生虫学教研室	42	292	9.0	16.0
2	廖力	南华大学医学院寄生虫学教研室	91	378	9.0	13.0
3	肖建华	南华大学医学院寄生虫学教研室	75	276	9.0	12.0
4	梁瑜	南华大学医学院寄生虫学教研室	35	132	6.0	9.0
5	张愉快	南华大学医学院寄生虫学教研室	45	337	11.0	17.0
6	刘传爱	南华大学医学院寄生虫学教研室	28	61	5.0	6.0
7	伍和平	南华大学医学院寄生虫学教研室	13	133	6.0	11.0