bcl-xL短发夹状RNA诱导人鼻咽癌细胞株CNE-2Z凋亡

• 作者: 何承伟 刘芳 周克元 张月飞 梁统
• 来源期刊: 癌症
• 学科: 医学
• 关键词: 鼻咽肿瘤 短发夹状RNA bcl-xL 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 646-652
• 页数: 7页
• 分类号: R739.63|Q524
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-467X.2005.06.002

摘要

背景与目的:实验证明bcl-xL在鼻咽癌细胞株CNE-2Z中存在高表达,它可能在鼻咽癌的发生发展、转移及治疗过程中产生耐药等方面发挥重要作用.本研究拟探讨bcl-xL短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)诱导CNE-2Z细胞凋亡的作用.方法:把表达bcl-xLshRNA的重组质粒pmU6-RNAi转染到CNE-2Z细胞中,用荧光染色和流式细胞术等方法检测细胞凋亡;用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测bcl-xL、bcl-2、survivin 和caspase-3的mRNA表达水平;用Western blot检测Bcl-xL、Caspase-3和P53的蛋白表达水平.结果:流式细胞术检测发现,pmU6-RNAi重组质粒作用24 h后,细胞出现明显的凋亡峰;Hoechst 33258单染在荧光显微镜下可见细胞缩小、染色质固缩和核断裂;RT-PCR分析pmU6-RNAi重组质粒作用细胞后明显下调了bcl-xL、bcl-2和caspase-3的mRNA表达水平,对survivin的mRNA表达水平无影响;Western blot分析pmU6-RNAi质粒作用细胞后明显下调了Bcl-xL、Caspase-3的蛋白表达水平,而大幅度上调了P53的蛋白表达水平.结论:bcl-xL shRNA可诱导CNE-2Z细胞凋亡;CNE-2Z细胞的凋亡可能与bcl-2、caspase-3和p53有着密切的关系;质粒表达的bcl-xL shRNA为开发鼻咽癌的基因治疗药物提供实验依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周克元	广东医学院生物化学与分子生物学研究所	210	1945	22.0	36.0
2	梁统	广东医学院生物化学与分子生物学研究所	74	799	17.0	25.0
3	张月飞	广东医学院第一附属医院耳鼻喉科	51	271	10.0	14.0
4	何承伟	广东医学院生物化学与分子生物学研究所	35	278	9.0	15.0
5	刘芳	广东医学院生物化学与分子生物学研究所	10	46	4.0	6.0