mRNA差异显示技术的研究进展

• 作者: 严钦泉 余建蒲 肖国樱 陈永华
• 来源期刊: 西北农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: mRNA差异显示技术 引物的设计 非放射性标记 假阳性
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 页码范围: 9-12,43
• 页数: 5页
• 分类号: Q781
• 字数: 3788字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-1389.2005.02.003

摘要

针对mRNA差异显示技术中的假阳性高和放射性污染等缺陷,文章从改进引物设计、应用非放射性标记、优化PCR参数、假阳性鉴定等方面进行了综述.①采用4种兼并或单碱基引物作锚定引物;用特异和长序列(≥20 bp)专一性引物作为随机引物,可增加特异性;在锚定引物之前加上了一段T7启动子序列,在随机引物前加上一段M13重复序列,可使DDRT-PCR的体系的扩增特异性更一致.②针对放射性同位素检测法的缺点,文章提出并比较了几种常用的非放射性同位素标记方法.③保证起始(模板)mRNA质量和浓度,降低dNTP浓度,选择最适的反转录和PCR退火温度,可优化PCR参数.①用两种不同的反转录酶进行反转录平行实验,很容易区分出RNA制备过程中造成的假阳性,目前假阳性鉴定大多还是以Northern印迹为基础,再作些适当的改进.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈永华		45	615	11.0	24.0
3	肖国樱	中国科学院亚热带农业生态研究所	82	1161	20.0	29.0
4	严钦泉		41	513	14.0	21.0
7	余建蒲		1	20	1.0	1.0