烟草天蛾几丁质酶的表达、纯化及多克隆抗体制备

• 作者: 孙毅 柴宝峰 梁爱华 王伟 郝婵娟
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 烟草天蛾 几丁质酶 原核表达 变性和复性 Western印迹 抗体制备
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 337-341
• 页数: 5页
• 分类号: Q966
• 字数: 4488字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0454-6296.2005.03.004

摘要

将烟草天蛾Manducasexta几丁质酶基因克隆入融合表达载体pET-28a,并在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中进行诱导表达.表达菌株经0.5 mmol/L IPTG诱导6～8 h后,几丁质酶表达并形成包涵体.在Ni2+-NTA亲和柱上经变、复性和纯化,得到可溶的几丁质酶.表达产物经Western印迹鉴定.采用切胶回收的方法切割回收包涵体,并将回收产物免疫新西兰大白兔,ELISA检测抗体效价达1:20 000.Western印迹检测证明抗体特异性良好.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙毅		143	2581	25.0	44.0
2	梁爱华	山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室	97	555	13.0	18.0
3	柴宝峰	山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室	72	1241	15.0	34.0
4	王伟	山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室	78	319	11.0	15.0
5	郝婵娟	山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室	1	9	1.0	1.0