小麦茎生长点转化研究初报

• 作者: RAZZAQ Abdul 张艳敏 杨帆 游颜杰 王海波 赵和 马峙英
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 小麦 In planta 生长点转化,GUS,npt Ⅱ-BADH
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 页码范围: 17-22
• 页数: 6页
• 分类号: S513
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-7091.2005.01.004

摘要

为了躲避转基因技术对组织培养的过分依赖,本研究以小麦为材料尝试了一种对生长点直接进行转化的方法,并初步证明了这一方法的可行性.具体做法是:将种子萌芽,然后剥去胚芽鞘暴露出生长点,再用玻璃纤维制作的小刷子将生长点刺伤,最后用带有外源基因的农杆菌进行侵染处理.用携带hph-GUS基因的LBA4404农杆菌,侵染处理1～11日龄幼苗(生长点),共培养7 d后检测新生芽中GUS的瞬时表达情况;侵染1～2日龄幼苗(生长点),取长成植株的2～3朵小花进行GUS稳定表达检测.又用携带BADH和nptⅡ基因的AGL1农杆菌菌株侵染1日龄的幼苗(生长点),在含100 mg/L卡那霉素的蛭石中进行选择.结果表明,GUS的瞬时表达率随被处理幼苗的日龄增加而降低,以2日龄幼苗为最高(10.7%).用花序检测GUS的稳定表达,被侵染受体为1日龄幼苗时的表达率高于2日龄的幼苗.蔗糖的存在并不提高GUS基因在花序中表达的频率.不过花序表现为GUS阳性的植株后代,经PCR检测后并没有证实GUS基因存在.用AGL 1菌株进行转化,获得了13.6%的抗卡那霉素的绿色植株,但只有3株呈现PCR阳性,且只有1株结了实.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马峙英		124	2336	29.0	41.0
2	赵和	河北省农林科学院遗传生理研究所	29	361	12.0	18.0
3	张艳敏	河北省农林科学院遗传生理研究所	30	314	12.0	17.0
4	杨帆	河北省农林科学院遗传生理研究所	7	70	3.0	7.0
5	RAZZAQ Abdul	河北省农林科学院遗传生理研究所	2	45	2.0	2.0
9	游颜杰	河北省农林科学院遗传生理研究所	1	30	1.0	1.0