特异性标记EIAV感染性克隆的构建及鉴定

• 作者: 南昌龙 张晓燕 沈弢 沈荣显 童骁 范秀娟 邵一鸣
• 来源期刊: 中国病毒学
• 学科: 农学
• 关键词: 马传染性贫血病毒 感染性克隆 S2基因 细胞病变效应 分子标签
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 257-261
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65
• 字数: 3755字
• 语种: 英文

摘要

用FLAGTM或6 His对EIAV疫苗株全基因感染性克隆pFD3的S2分子进行分子标记,以建立EIAV疫苗株与野毒株感染鉴别诊断的方法.标记产物pFD3-FLAG和pFD3-HISADD转染驴胎皮细胞 (FDD)后收获衍生病毒并用逆转录酶活性检测和PCR方法确定其感染性. 在FDD细胞上盲传至第五代后收获细胞培养上清再感染驴单核巨噬细胞 (DL),盲传三代后pFD3-FLAG RT酶活性显示弱阳性,未见明显的细胞病变;pFD3-HISADD为强阳性,且细胞病变效应明显,在电镜下可见明显的病毒颗粒.与父本克隆pFD3相比,在细胞水平上二者复制特性有明显的不同.证明在DL细胞上S2基因的完整性是病毒复制很重要的因素.