建立了反相高效液相色谱(RP-HPLC)法同时测定延胡索药材中延胡索乙素与原阿片碱含量的方法,并对不同产地延胡索药材中延胡索乙素与原阿片碱含量进行了考察.结果表明,使用Phenomenx Luna C18色谱柱,甲醇-磷酸盐缓冲溶液(pH=7.68,V:V=65:35)流动相,在检测波长281 nm下,测定延胡索乙素与原阿片碱的线性范围分别为0.13~4.68μg和0.09~3.24μg,平均回收率分别为101.86%和98.13%,RSD分别为1.42%和1.36%.结果表明,此法简便、准确、快速,可用于药材中延胡索乙素与原阿片碱含量的测定,也可用于含这两种生物碱的药材的质量评价;两种生物碱含量在不同产地及来源延胡索药材中有较大差别.