视网膜色素上皮细胞中诱导型一氧化氮合酶、精氨酸代谢相关酶的表达及一氧化氮对细胞紧密连接的影响

• 作者: 张文一 王竫华 白海青
• 来源期刊: 中华眼底病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 色素上皮,眼/代谢 一氧化氮合酶 精氨酸/代谢 基因表达调控,酶学 瓜氨酸/代谢
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 32-36
• 页数: 5页
• 分类号: R446-39|R770.43|R773
• 字数: 4448字
• 语种: 中文

摘要

目的研究在免疫活化的视网膜色素上皮(RPE)细胞中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)被诱导、产生NO时,其底物精氨酸的来源;产生的NO对RPE细胞紧密连接的影响. 方法用干扰素γ(IFNγ)、肿瘤坏死因子α(TNFα)、脂多糖(LPS)刺激大鼠视网膜色素上皮细胞系(RPE-J)细胞,Northernblotting、Western blotting方法研究RPE-J细胞内精氨酸再生系瓜氨酸NO循环的相关酶的表达及地塞米松和环磷酸腺苷(cAMP)对iNOS表达的影响.并通过免疫细胞化学和Western blotting方法,研究产生的NO对RPE-J细胞紧密连接功能的影响. 结果活化的RPE-J细胞中,iNOS和精氨酸的再生系瓜氨酸-NO循环相关酶精氨酸琥珀酸合成酶(AS)在mRNA和蛋白质水平同时被诱导,精氨酸琥珀酸裂解酶(AL)没有被诱导,同时产生NO,cAMP可以增加NO的产量.NO不仅以精氨酸为底物产生,而且也可由瓜氨酸产生.产生的NO破坏RPE-J细胞的紧密连接功能,与紧密连接相关蛋白ZO-1的合成量减少.结论在活化的RPE-J细胞中产生NO时,由瓜氨酸-NO循环再生的精氨酸是RPE-J细胞中产生NO的底物精氨酸的主要来源;NO对RPE-J细胞的紧密连接起破坏作用.