逆转录病毒介导的PrV Ea株gD基因转基因细胞系的建立

• 作者: 兰盛银 吴美洲 洪文洲 石德时 陈焕春
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: PrV Ea株 gD基因 体外表达 细胞系 逆转录病毒介导
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 48-53
• 页数: 6页
• 分类号: S852.65|Q784
• 字数: 3757字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2005.01.010

摘要

采用逆转录病毒介导的方法,将PrV Ea株gD基因整合进PK-15细胞染色体中,建立起表达gD蛋白的细胞系PKD.通过荧光观察,发现PKD表达的gD分布在细胞膜上,具备原有的免疫反应性;同时,还发现gD蛋白在PKD细胞膜上呈明显极性分布.PCR技术和间接免疫荧光染色法对PKD进行检测的结果表明该细胞系具有良好的遗传稳定性.在相同培养条件下,PKD细胞的生长速度及形态与正常PK-15细胞无明显差异.用脂质体介导的方法,将PrV Ea株基因组转染PKD细胞,在转染后30 h细胞发生典型病变,表明PKD细胞对脂质体的毒害具有耐受性.TCID50测定结果显示:PKD对PrV Ea株增殖尽管有明显的抑制作用,但PrV Ea株仍能在其上正常增殖.上述研究结果提示:所构建的细胞系PKD可用于构建PrV Ea株 gD基因缺失毒株,为PrV Ea株gD基因缺失毒株的构建提供了必备的工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈焕春	华中农业大学动物医学院动物病毒室	331	4866	36.0	53.0
2	吴美洲	华中农业大学动物医学院动物病毒室	20	194	9.0	13.0
3	兰盛银	华中农业大学生命科学技术学院分子细胞生物学研究室	13	207	7.0	13.0
4	洪文洲	华中农业大学动物医学院动物病毒室	16	144	7.0	11.0
5	石德时	华中农业大学生命科学技术学院分子细胞生物学研究室	26	424	13.0	20.0