口蹄疫病毒多基因重组质粒的体外表达及衣壳组装

• 作者: 冷青文 刘在新 刘湘涛 孙世琪 谢庆阁 郭慧琛
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 农学
• 关键词: 口蹄疫病毒 真核表达质粒 BHK-21 体外表达
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 228-234
• 页数: 7页
• 分类号: S856.659.6
• 字数: 5340字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8721.2005.03.011

摘要

PCR扩增获得包含口蹄疫病毒P1、2A、3C、3D及部分2B编码区的目的基因片段P12X3C3D,将P12X3C3D经AflⅡ和XbaⅠ双酶切后,定向克隆于真核表达质粒载体pcDNA3.1(+);另将PCR扩增获得的P12X3C3D直接与真核表达质粒载体pTARGETTM连接,进行筛选、鉴定及DNA序列分析,分别获得重组质粒pcDNA3.1/P12X3C3D、pTARGET/P12X3C3D.将重组质粒分别转染BHK-21细胞,通过双抗体夹心ELISA方法和间接免疫荧光标记方法检测细胞中表达的口蹄疫病毒抗原,用磷钨酸负染,以电子显微镜观察转染重组质粒的细胞中组装的口蹄疫病毒空衣壳.结果表明,口蹄疫病毒基因组片段正确克隆到真核表达质粒载体上,重组质粒pcDNA3.1/P12X3C3D、pTARGET/P12X3C3D均可在BHK-21细胞中表达FMDV目的蛋白.其中重组质粒pTARGET/P12X3C3D表达的口蹄疫病毒抗原蛋白,能够在细胞内正确组装成病毒空衣壳.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘在新		7	53	5.0	7.0
2	郭慧琛		4	22	3.0	4.0
3	孙世琪		4	22	3.0	4.0
4	刘湘涛		8	20	3.0	4.0
5	谢庆阁		10	46	4.0	6.0
6	冷青文	石河子大学动物科技学院	13	113	6.0	10.0