人血管内皮细胞生长因子基因克隆、表达与纯化

• 作者: 周明乾 孟民杰 王小宁 胡志明 阮光萍 马骊
• 来源期刊: 中国生化药物杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 血管内皮细胞生长因子 基因克隆 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 135-138
• 页数: 4页
• 分类号: Q785
• 字数: 2823字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-1678.2005.03.003

摘要

目的研究人血管内皮细胞生长因子121(hVEGF121)基因在pET-24a(+)中的表达,获得高效表达、具有生物学活性的rhVEGF121.方法提取人原髓白血病细胞(HL60)总RNA,RT-PCR扩增hVEGF121基因,经DNA序列分析后,克隆于高效原核表达载体pET-24a(+),并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,超滤复性,DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换和Sephacry S-100分子筛色谱纯化后,以HUVEC测定其生物学活性.结果SDS-PAGE结果显示,目的蛋白质以包涵体形式存在,表达量达菌体总蛋白质的20%,纯化后rhVEGF121纯度达95%以上,生物学活性检测证实,具有刺激HUVEC增殖的功能.结论在原核系统中实现了hVEGF121的高效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马骊	南方医科大学分子免疫学研究所	55	232	8.0	13.0
2	胡志明	南方医科大学分子免疫学研究所	25	210	8.0	13.0
3	周明乾	南方医科大学分子免疫学研究所	18	100	6.0	9.0
4	王小宁	南方医科大学分子免疫学研究所	11	116	6.0	10.0
5	孟民杰	南方医科大学分子免疫学研究所	2	8	1.0	2.0
6	阮光萍	南方医科大学分子免疫学研究所	2	24	1.0	2.0