结缔组织生长因子的分泌表达及ELISA检测法的建立

• 作者: 刘乃丰 卢惠霞 吴国球 孙宏伟 张粉梅 钱娟英 黄立新
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 结缔组织生长因子 纤维化 酶联免疫吸附试验
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 4-8
• 页数: 5页
• 分类号: Q78|R446.6
• 字数: 5643字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-764X.2005.01.002

摘要

目的制备结缔组织生长因子(CTGF)抗原,建立ELISA检测方法.方法从血管内皮细胞中提取总RNA,逆转录合成cDNA,设计特异性引物,通过PCR方法扩增CTGF C区242～349位氨基酸基因,插入噬菌体包膜蛋白基因Ⅲ的上游,制备CTGF融合蛋白.用纯化后的融合蛋白免疫家兔,获得抗体,抗体纯化后标记HRP,建立ELISA.结果成功克隆CTGF C区基因,插入表达载体经IPTG诱导后获得分子量为25 000的融合蛋白,免疫学检测证实为CTGF.所得抗体用HRP标记.建立的ELISA法检测灵敏度为2 ng/ml,批内及批间平均变异系数为5.4%和7.5%,平均回收率为104.2%.血红蛋白浓度在0～50 mmol/L,总胆红素在0～150 μmol/L,三酰甘油在0～2.0 mmol/L对测定结果无影响.2例慢性乙型肝炎病人血标本,5例糖尿病肾病、3例肾功能衰竭、3例慢性肾炎尿标本为阳性.结论 CTGF可以作为判断纤维化发生、进展及预后的一个新指标.CTGF ELISA检测方法的成功建立,为临床应用打下基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘乃丰	东南大学心血管研究所	171	1070	15.0	23.0
2	吴国球	东南大学附属中大医院临床检验中心	46	241	8.0	13.0
3	孙宏伟	东南大学附属中大医院临床检验中心	9	60	4.0	7.0
4	黄立新	东南大学附属中大医院临床检验中心	4	29	3.0	4.0
5	张粉梅	东南大学附属中大医院临床检验中心	3	14	2.0	3.0
6	钱娟英	东南大学附属中大医院临床检验中心	7	59	5.0	7.0
7	卢惠霞	东南大学附属中大医院临床检验中心	3	14	2.0	3.0