siRNA对小鼠血管内皮细胞NF-kB p65表达的抑制作用

• 作者: 于曙东 余云生 叶文学 周晓彤 沈振亚 滕小梅 焦鹏 黄浩岳
• 来源期刊: 现代免疫学
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 小干扰RNA 核因子κB 血管内皮细胞
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 208-212
• 页数: 5页
• 分类号: R392.12
• 字数: 4269字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-2478.2005.03.008

摘要

探索RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术在抑制血管内皮细胞激活中的应用前景.利用阳离子脂质体LipofectamineTM000作为转染试剂将化学合成的小鼠NF-κB p65的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染人小鼠EOMA细胞,RT-PCR测定细胞内NF-κB p65 mRNA表达,Westem blot检测细胞内NF-κB p65蛋白水平.同时观察siRNA对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的NF-κB激活的抑制作用.结果显示:在转染siRNA后的第24小时,细胞内NF-κB p65mRNA水平降低,蛋白表达量明显减少,而在第48小时、72小时细胞内NF-κB p65蛋白已经无法测出;在TNF-α刺激后,转染siRNA的细胞组内NF-κB p65的表达也明显受到抑制.说明RNAi技术可以抑制NF-κB p65的表达,为进一步研究血管内皮细胞的保护提供了有效的方法.