人NIT1基因原核表达载体的构建和鉴定

• 作者: 吴汉林 周清华 孙芝琳 朱文 王允 王艳萍 车国卫 陈晓禾
• 来源期刊: 中国肺癌杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 原核表达载体 人NIT1基因 FHIT基因 肺肿瘤
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 研究生专栏
• 页码范围: 81-84
• 页数: 4页
• 分类号: R743.2
• 字数: 3265字
• 语种: 中文

摘要

背景与目的目前已知FHIT基因为抑癌基因,其结构和功能的异常与肺癌的发生、发展有密切关系,而且可能与NIT1基因存在功能上的相关性.但是,FHIT基因与NIT1基因调控肺癌发生发展的分子机制尚未明了.本研究旨在构建人NIT1基因原核表达载体,为进一步研究人肺癌细胞株中NIT1基因和FHIT基因的关系打下基础.方法应用RT-PCR法获得NIT1基因cDNA,定向克隆到融合表达载体pET-32a中,作双酶切和测序鉴定.结果①克隆的cDNA片断包含了人NIT1基因翻译区的全部序列,翻译区序列与GenBank登录的人NIT1 cDNA序列完全一致.②对构建的原核表达载体做双酶切,获得了预期的目的条带.结论通过RT-PCR和定向克隆的方法,成功构建了人NIT1基因的原核表达载体,为研究人NIT1蛋白的表达和进一步研究人肺癌细胞中NIT1基因和抑癌基因FHIT的关系奠定了基础.