腺病毒介导转化生长因子β1基因阻逆兔椎间盘退行性变的实验

• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 转化生长因子β 椎间盘 腰椎 基因 转染 磁共振成像 免疫组织化学
• 年，卷（期）: 2005,（34）
• 所属期刊栏目: 脊柱疾病相关基础研究
• 页码范围: 99-101
• 页数: 4页
• 分类号: R681
• 字数: 5511字
• 语种: 中文

摘要

目的:观察腺病毒载体搭载的人转化生长因子基因对兔椎间盘退行性变模型的治疗作用.方法:实验于2003-03/2004-09在协和医院骨科实验室进行.取4个月龄健康雌性日本大白兔30只,于协和医院骨科实验室行L4～5,L5～6前外侧纤维环损伤手术以构建椎间盘退行性变模型.术后8周将动物随机分入3组.治疗组14只,注射20μL(10×106pfu)腺病毒载体介导人转化生长因子β1基因;对照组8只,注射20μL(10×106pfu)腺病毒载体介导标志基因(Ad/CMV-LacZ);空白组6只,注射20μL生理盐水.另取2只同类的健康白兔作为正常对照,不予任何手术或治疗.注射后3周取各组椎间盘组织行苏木精-伊红染色、T2加权磁共振成像、蛋白免疫印迹、转化生长因子β1免疫组织化学观察.结果:①兔椎间盘组织切片观察结果:注射3周后,治疗组切口已基本愈合,髓核细胞大量增生;空白组纤维环外侧内2/3部分仍未愈合,部分髓核细胞坏死、凋亡;对照组较空白组改善不明显.②MRI扫描结果:治疗组椎间盘信号较对照组及空白组有所恢复,但并未完全达到正常椎间盘水平.③蛋白质免疫印迹分析结果:治疗组转化生长因子β1含量较对照组和空白组有显著上升(P＜0.01).④转化生长因子β1免疫组织分析结果:治疗组转化生长因子β1为强阳性表达(＞50%),空白组几乎没有转化生长因子β1表达,对照组与空白组相似.治疗组显著高于对照组(x2=20.563,P=0.00).结论:腺病毒载体介导人转化生长因子β1基因转染退行性变的椎间盘细胞能够有效提高髓核细胞内转化生长因子β1含量,阻逆椎间盘退行性变.