烟实夜蛾触角普通气味结合蛋白ⅡcDNA的克隆、序列分析及在大肠杆菌中的表达

• 作者: 原国辉 安世恒 巩中军 郭线茹
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 烟实夜蛾 普通气味结合蛋白 触角 基因克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 18-23
• 页数: 6页
• 分类号: Q966
• 字数: 5191字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0454-6296.2005.01.004

摘要

利用RT-PCR技术扩增了编码烟实夜蛾Heltcoverpa assulta雌、雄虫触角普通气味结合蛋白Ⅱ的cDNA片段,将其克隆至pGEM-T Easy载体,获得了普通气味结合蛋白Ⅱ基因成熟蛋白阅读框序列.将该基因重组到表达型质粒pET-30a(+)中,并转化入原核细胞中表达.序列测定结果表明,烟实夜蛾触角普通气味结合蛋白基因的成熟蛋白阅读框全长489 bp,编码162个氨基酸残基,预测分子量和等电点分别为18.2 kD和5.35.推导的氨基酸序列与已报道的10种昆虫普通气味结合蛋白Ⅱ高度同源(73%～98%),并具有气味结合蛋白的典型特征.SDS-PAGE和Western印迹分析表明,经IPTG诱导,普通气味结合蛋白Ⅱ基因能在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,电泳检测到一条约23 kD大小的外源蛋白,与预测的融合蛋白分子量大小相应.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭线茹	河南农业大学植物保护学院	138	1361	20.0	27.0
2	原国辉	河南农业大学植物保护学院	142	1540	23.0	31.0
3	巩中军	河南农业大学植物保护学院	2	53	2.0	2.0
4	安世恒	浙江大学应用昆虫学研究所	3	34	2.0	3.0