两种高效RNA干涉载体系统的构建及应用

• 作者: 付汉江 朱捷 杨明 江红 郑晓飞 铁轶
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 学科: 生物学
• 关键词: RNA干涉 H1启动子 p53基因
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 377-383
• 页数: 7页
• 分类号: Q782
• 字数: 4317字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3282.2005.04.015

摘要

在真核细胞基因功能研究中,RNA干涉(RNAi)已成为一种强有力的选择性沉默基因表达的实验工具.建立一套可在哺乳动物培养细胞中高效、经济地表达siRNA的载体系统是RNA干涉研究的必要前提之一.从HepG2细胞基因组DNA中克隆得到H1全长启动子(374bp),以之为基础构建了两套RNA干涉载体系统,pSL和带有绿色荧光蛋白(EGFP)标签的pESL,并对p53基因进行了相应的RNA干涉研究.干涉质粒瞬时转染HepG2细胞后,分别利用半定量RT-PCR和蛋白质印迹检测p53表达水平.与商品化载体pSilencerTM3.1-H1 hygro相比,pSL和pESL对p53基因表达具有更高的干涉效率.结果显示:干涉载体pSL和pESL能高效特异地下调目的基因表达,可作为哺乳动物中基因功能分析的有效工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑晓飞	军事医学科学院放射医学研究所	53	237	7.0	11.0
2	朱捷	军事医学科学院放射医学研究所	26	95	6.0	7.0
3	付汉江	军事医学科学院放射医学研究所	26	84	5.0	6.0
4	杨明	军事医学科学院放射医学研究所	31	442	11.0	20.0
5	江红	军事医学科学院放射医学研究所	18	71	5.0	6.0
6	铁轶	军事医学科学院放射医学研究所	13	55	4.0	6.0