RhoB对胃癌细胞SGC7901的负性调控作用

• 作者: 乔泰东 刘娜 孙立军 张国云 梁洁 樊代明 毕锋 潘阳林
• 来源期刊: 现代肿瘤医学
• 学科: 医学
• 关键词: RhoB 胃癌 可诱导表达载体
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 4-7
• 页数: 4页
• 分类号: R735.2
• 字数: 4017字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-4992.2005.01.002

摘要

目的研究RhoB对胃癌细胞SGC7901增殖调控作用.方法用PCR扩增出RhoB的全长cDNA,构建RhoB可诱导表达载体pGene/V5-His-RhoB;脂质体介导法将调控载体pSwitch及诱导表达载体pGene/V5-His-RhoB先后转入人胃癌细胞SGC7901中,筛选出稳定抗性克隆;Western blot检测米非斯酮诱导后转染细胞中RhoB蛋白的表达.用MTT assay检测RhoB转染细胞株的生长速度、双苯并咪唑染料(Hoechst 33258)活细胞吸收分析法、流式细胞仪(FCM)检测RhoB对胃癌细胞凋亡指数作用.结果成功构建RhoB可诱导真核表达载体pGene/V5-His-RhoB,并经酶切和测序鉴定;转染后经潮霉素B和Zeocin筛选出稳定抗性克隆SGC7901/RhoB;米非斯酮诱导出RhoB蛋白表达,在诱导24小时后蛋白表达最高;细胞增殖试验结果显示,RhoB表达上调后胃癌细胞增殖受到抑制;细胞凋亡检测提示高表达RhoB可明显诱导胃癌细胞凋亡.结论 RhoB对胃癌细胞增殖具有负性调控作用,可诱导胃癌细胞出现凋亡.