用8质粒病毒拯救系统产生H9N2/WSN重组A型流行性感冒病毒

• 作者: 刘玉良 刘秀梵 卢建红 石火英 贾立军 邵卫星 韦栋平
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 农学
• 关键词: A型流行性感冒病毒 H9N2亚型 共转染 8质粒系统 反向遗传操作技术
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 48-53
• 页数: 6页
• 分类号: S852.65+9.5
• 字数: 4957字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8721.2005.01.010

摘要

把禽流行性感冒(流感)病毒A/Chicken/Shanghai/F/98(H9N2)的血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)基因cDNA克隆至polⅠ-polⅡ双向转录和表达载体pHW2000,用这两种质粒与8质粒病毒拯救系统中流感病毒A/WSN/33(H1N1)6个内部基因eDNA的质粒组合(6+2重排),共转染COS-1细胞,产生了能在鸡胚中高滴度增殖的H9N2/WSN重组病毒.用A/WSN/33的8个基因cDNA质粒作对照,也产生了转染子病毒.经过EID50测定和MDCK 感染实验,新基因型H9N2/WSN病毒感染鸡胚的能力强(EID50为10-11/0.2ml),而且对鸡胚的毒力弱,在不加胰酶的情况下不使MDCK细胞产生病变.经电镜观察,两个转染子病毒的形态与野生型流感病毒相似.反向遗传操作技术的建立,为对禽流感病毒基因功能和疫苗构建等方面的研究提供了新的手段.