绿僵菌几丁质酶的分离纯化及性质

• 作者: 李佐虎 杨革 陈洪章
• 来源期刊: 化工学报
• 关键词: 金龟子绿僵菌 几丁质酶 分离纯化 酶学性质
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 生物化学工程、制药、食品和天然产物加工
• 页码范围: 672-676
• 页数: 5页
• 分类号: Q934
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0438-1157.2005.04.021

摘要

从自然罹病死亡的金龟子体内分离到一株金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae),它在几丁质的诱导下能产生较高活性的几丁质酶.发酵液经硫酸铵盐析、DEAE纤维素柱层析、Phenyl SepharoseTM 6 Fast Flow疏水柱层析等方法,得到电泳纯的几丁质酶.用SDS-PAGE测得该酶相对分子质量为61.5 kD,而经质谱分析为57.14 kD.最适反应温度为55 ℃,最适反应pH值为6.0,酶的等电点pI为4.02,其N末端序列为VIGPAAPL,用硫酸-酚法测得其含糖量为56.2%.水解几丁质的Km为14.5 μmol·L-1.该酶在45 ℃,pH值3.0～9.5较为稳定.Zn2+、Ca2+、Ba2+和Mn2+离子对几丁质酶活性有明显的促进作用,而Hg2+、Co2+和Fe2+离子完全抑制几丁质酶的活性.此酶还可被EDTA所抑制,表明金属离子为其活性所必需.PMSF试剂对几丁质酶的活力影响比较大,丝氨酸可能是酶活力的必需基团.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈洪章	中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室	126	2598	30.0	47.0
2	李佐虎	中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室	118	2296	26.0	44.0
3	杨革	中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室	3	30	2.0	3.0