高效建立129S1/SvImJ 小鼠胚胎干细胞方法的探讨

• 作者: 吴蓉蓉 姚行 姜祖韵 张铭 戴利成 袁毅君 赵小立 陆永良 陈良标
• 来源期刊: 浙江大学学报（理学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 129S1/SvImJ小鼠 囊胚 饲养层 消化方法 胚胎干细胞
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 574-578
• 页数: 5页
• 分类号: Q813.11
• 字数: 4311字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1008-9497.2005.05.022

摘要

选取超排后129S1/SvImJ品系小鼠的优质囊胚,使用辐照后冻存复苏的小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层,对比高浓度酶短时间消化法和低浓度酶长时间消化法,以0.25%胰酶-0.04%EDTA高浓度酶短时间消化法高效建立了4株小鼠胚胎干细胞系,建系率为36.31%.碱性磷酸酶,核型分析,体外分化和体内分化能力以及小鼠胚胎干细胞表面特异性分子标志0ct-4和Nanog的检测等表明,4个ES细胞系均为典型的小鼠胚胎干细胞系.所建立的ES细胞系为大规模培养ES细胞,进行后续的实验建立了理想的材料平台.