正交试验法确定测定意大利蜜蜂头部乙酰胆碱酯酶反应的最佳条件

• 作者: 张莹 高希武 黄建
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 蜜蜂 乙酰胆碱酯酶 正交试验 方差分析 最佳条件
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 简报
• 页码范围: 627-632
• 页数: 6页
• 分类号: Q965.9
• 字数: 4522字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0454-6296.2005.04.024

摘要

用正交试验法研究了酶浓度、底物浓度、反应体系的pH值、反应温度和反应时间5个因素对测定意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica Spinola头部乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的影响, 并从试验组合中选出最佳条件.蜜蜂AChE活性的测定采用Gorun(1978)改进的Ellman方法, 以碘化硫代乙酰胆碱(ATCI)为底物, 5, 5'- 二硫双硝基苯甲酸(DTNB)为显色剂, 测定反应物在412 nm波长下的光密度值, 用考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量, 经计算得到蜜蜂头部AChE的比活力.对正交试验结果进行极差分析和方差分析, 结果表明各因素对实验结果影响的大小顺序为:温度＞pH值＞时间＞酶浓度＞底物浓度.并得出测定蜜蜂头部AChE活性的最佳条件是:酶终浓度0.2头/mL、底物终浓度0.8 mmol/L、pH值7.5、温度40℃及反应时间5 min.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张莹	福建农林大学植物保护学院	11	57	2.0	7.0
5	黄建	福建农林大学植物保护学院	94	1255	22.0	30.0
6	高希武	中国农业大学昆虫学系	201	3640	32.0	49.0