蛋白激酶C对腹膜间皮细胞己糖激酶活性的调控

• 作者: 樊怡 马健飞
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 蛋白激酶C 己糖激酶 上皮 腹膜
• 年，卷（期）: 2005,（37）
• 所属期刊栏目: 肾脏病基础研究
• 页码范围: 2619-2622
• 页数: 4页
• 分类号: R5
• 字数: 4059字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0376-2491.2005.37.007

摘要

目的研究蛋白激酶C ( protein kinase C, PKC ) 对腹膜间皮细胞 ( peritoneal mesothelium cell, PMC ) 己糖激酶 ( hexokinase, HK )活性的调节作用,以及HK活性与PMC对葡萄糖摄取的相关性.方法大网膜取自雄性SD大鼠,胰蛋白酶-EDTA消化法用于PMC的原代培养及传代,细胞角蛋白抗体的间接免疫荧光染色用于PMC的鉴定; 6-磷酸葡萄糖脱氢酶耦联比色法检测HK活性,观察PKC激活剂--佛波酯( PMA、PDD )及经典型PKC( classical PKC,cPKC )抑制剂--G(o)6976对HK活性的影响;比色法检测培养液内葡萄糖的消耗量作为细胞对葡萄糖净利用指标.结果原代培养的PMC 24 h贴壁,5～8 d融合,形成铺路石样外观,细胞角蛋白在胞浆阳性表达.PMA对HK活性的诱导呈时间和剂量依赖性,并增加了PMC对葡萄糖的净利用.0.01、0.1及1 μmol/L的PMA作用 24 h后,HK活性分别提高30.7 %、59.9 % 及99.1%(P<0.05).1 μmol/L的PMA作用于PMC,6 h后HK活性开始上调,24 h 时达到高峰(分别为21.3 % 和100.4%,P<0.05),培养液内的葡萄糖基本消耗一半(2 mmol/L,P<0.05).0.1 μmol/L PDD对HK活性的诱导与1 μmol/L的PMA作用相似,PDD的结构相似物4α-PDD对HK活性无上述作用.G(o)6976抑制了PMA对HK活性的诱导.10、20、30、40及50 μmol/L的G(o)6976预处理PMC 30 min,再予1μmol/L PMA培养24 h,HK活性分别抑制了14.6 %、26.8 %、34.2 %、44.2 % 及54.9 %(P<0.05).结论 PKC使HK活性上调,增加了细胞对葡萄糖的净利用,可能与长期腹膜透析后PMC对葡萄糖的吸收加速有关;cPKC抑制剂对HK活性的阻断可能成为提高腹膜透析超滤的有效途径之一.