免疫组织化学方法在人/山羊嵌合体人源细胞鉴定中的应用

• 作者: 巩芷娟 黄淑帧
• 来源期刊: 中华检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人/山羊嵌合体 免疫组织化学 造血干细胞
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 基础实验诊断研究
• 页码范围: 74-78
• 页数: 5页
• 分类号: R4
• 字数: 3440字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:1009-9158.2005.01.024

摘要

目的在胎山羊宫内移植人造血干细胞(hHSC)获得人/山羊嵌合体基础上,应用免疫组织化学技术分析嵌合体实验山羊肝、肺和肾组织中人源细胞的生长及分化情况.方法对7头经荧光激活的细胞分选(FACS)、荧光原位杂交(FISH)和分子生物学方法鉴定为阳性的实验山羊,在出生后不同时间取其肝、肺和肾组织,制作石蜡切片,然后采用免疫组织化学的EnVision系统,用特异性人增殖期细胞核抗原(PCNA)单抗、人肝细胞特异性抗原(HSA)单抗及人β-2微球蛋白(β-2M)单抗鉴定这些组织中的人源细胞.结果 7头实验山羊的肝组织中有一定比例的PCNA和HSA抗体阳性染色细胞,肺和肾组织内有PCNA及β-2M抗体阳性染色细胞,正常人的肝、肺和肾细胞也呈阳性染色,而非hHSC移植的正常山羊的肝、肺和肾组织中未见有阳性染色细胞.结论胎山羊宫内移植hHSC所形成的嵌合体的肝脏中有人源细胞存活,并检测到表达人肝细胞特异抗原的人肝样细胞.免疫组化鉴定的阳性结果与分子生物学等方法的鉴定结果相符.此外,在嵌合体山羊肺和肾组织中也发现有人源细胞.