串珠镰刀菌分离菌株PCR筛选鉴定方法的研究

• 作者: 刘秀梅 王晓英
• 来源期刊: 中国食品卫生杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 镰刀茵属 序列分析 DNA 聚合酶链反应 食品
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 第一届ICMSF-中国国际食品安全会议论文选登
• 页码范围: 145-150
• 页数: 6页
• 分类号: R15|Q949.32|TS201.3
• 字数: 4660字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-8456.2005.02.015

摘要

为监测根食中的串珠镰刀茵污染,根据rDNA18S、5.8S、28S及其间区ITS和ITS2序列,设计了1对镰刀茵属特异性引物Fu3/Fu4及2对串珠镰刀菌种特异性引物Fu5/Fu4(Ⅰ型IrS2特异性)和Fu3/Fu2(Ⅱ型ITS2特异性),建立了串珠镰刀菌PCR及复合PCR检测方法.Fu3/Fu4、Fu3/Fu2和Fu5/Fu4分别扩增516bp、375bp和188bp的DNA片段.Fu3/Fu4PCR的检出灵敏度为10pg,Fu5/Fu4为100pg,复合PCR(Fu3、Fu5和Fu4)的检出限为100pg,分别相当于每次反应检出103、104和104个孢子.复合PCR可以同时鉴别镰刀菌属和串珠镰刀菌种.检测了32株从山东、浙江、安徽和河南4省区分离的串珠镰刀茵及交孢镰刀茵,26株为I型ITS2特异性,4株为Ⅱ型ITS2特异性,两株待定.该方法可用于大量快速筛选串珠镰刀菌,有利于进一步开展串珠镰刀茵在我国的生态分布、生物地域学及系统发育学等方面的研究.该方法快速、敏感、特异,适宜粮食中串珠镰刀菌污染的监测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘秀梅	中国疾控中心营养与食品安全所	23	1314	17.0	23.0
2	王晓英	中国疾控中心营养与食品安全所	3	44	2.0	3.0