目的:通过HBx基因的克隆、序列对比和进化树分析以及pcDNA3.1(+)-HBx真核表达载体的构建,为进一步研究HBx基因与肝癌发生发展的关系打下基础.方法:用Oliga6.0结合Primer Premier 5.0软件设计特异性引物,通过PCR方法从广西HBsAg阳性病人血清中(血清型 Adrq+)分离得到的病毒株构建的HBxAg质粒中扩增HBx基因.用DNA star5.01和Vector NTI Suite 8.0软件进行序列对比分析和进化树构建.经双酶切将HBx基因定向插入到pcDNA3.1(+)质粒中.结果:成功克隆了基因型C型突变型HBx基因,并构建出真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBx.新基因被GeneBank接受,在GeneBank上登录号为AY839630.序列对比和进化树分析表明,新克隆的基因与野生基因型C型有高度的同源性(97.8%),2.2%的变异.结论:从广西HBsAg阳性病人病毒株(血清型Adrq+)中发现了新的基因型C型突变型HBx基因(mutant genotype C).pcDNA3.1(+)-HBx真核表达载体的构建,将为进一步研究HBx基因在树(鼠句)实验性肝癌诱发过程中所起的作用打下基础.