CD/5-FC对KSHV肿瘤转化基因K12诱导NIH3T3转化细胞的杀伤作用

• 作者: 卢春 唐桂霞
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: 卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV) 肿瘤转化基因K12 CD/5-FC系统 凋亡
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 188-197
• 页数: 10页
• 分类号: R373
• 字数: 6933字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8721.2005.03.005

摘要

采用分子克隆技术构建含卡波济肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus,KSHV)转化基因K12和含胞嘧啶脱氨酶(CD)基因重组逆转录病毒表达质粒,分别命名为LZRS-K12和pLXSN-Fcy::Fur.将LZRS-K12质粒转染NIH3T3细胞系,诱导细胞转化获得具有肿瘤细胞生物学特性的N/K12细胞,进一步将pLXSN-Fcy::Fur质粒转染N/K12细胞,获得含CD基因的N/K12/FF细胞.加入5-氟胞嘧啶(5-FC)后,采用MTT法、流式细胞仪和免疫组化(IHC)等方法,分别检测细胞存活率、凋亡率及凋亡相关蛋白的表达.结果显示,N/K12/FF细胞在使用5-FC后存活率明显下降.流式细胞仪检测结果显示,5-FC作用后的N/K12/FF细胞的凋亡率与作用前相比增加了4.6%.与此同时,经5-FC作用后的N/K12和N/K12/FF细胞的生长周期发生了明显变化,均表现为G0-G1期细胞比率降低,S和G2-M期细胞比率增高.5-FC使得N/K12细胞的增殖主要阻滞在G2-M期,而N/K12/FF细胞的增殖主要阻滞在S期.IHC检测结果表明,N/K12细胞在5-FC使用前后Fas和Fas-L表达改变均不明显;而N/K12/FF细胞在5-FC使用后的Fas和Fas-L表达水平均明显高于5-FC使用前的水平.提示,CD/5-FC对KSHV肿瘤转化基因K12诱导NIH3T3转化细胞具有杀伤作用;凋亡有可能介导了部分杀伤过程;Fas和Fas-L有可能部分参与凋亡的诱导.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢春	南京医科大学微生物学与免疫学系	92	236	7.0	9.0
2	唐桂霞	南京医科大学微生物学与免疫学系	17	62	5.0	6.0