棉铃虫N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的分离纯化及酶学性质

• 作者: 关雄 尤民生 王君 陈清西 黄小红
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 棉铃虫 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶 分离纯化 动力学 稳定性
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 498-502
• 页数: 5页
• 分类号: Q965
• 字数: 3934字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0454-6296.2005.04.004

摘要

以棉铃虫Helicoverpa armigera蛹为材料,通过硫酸铵沉淀分级分离、Sephadex G-200分子筛柱层析和DEAE-32离子交换柱层析纯化,获得聚丙烯酰胺凝胶电泳纯的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶酶制剂.纯酶的比活力为2 678.79 U/mg.以对硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(pNP-β-D-GlcNAc)为底物,研究酶催化底物水解的反应动力学.结果表明:酶的最适pH为5.63,最适温度为55℃.该酶在pH 4～8区域较稳定,而在pH>8时能迅速失去活力;在50℃以下处理30 min,酶活力仍保持稳定,高于50℃,酶很快失去活力.酶促反应动力学符合米氏双曲线方程,测得米氏常数Km为0.16 mmol/L,最大反应速度Vm为10.73 μmol·L-1·min-1.酶催化pNP-β-D-GlcNAc反应的活化能为66.24 kJ/mol.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈清西	厦门大学生命科学学院教育部细胞生物学与肿瘤细胞工程重点实验室	114	2033	24.0	40.0
2	尤民生	福建农林大学动物科学学院生物农药与化学生物学教育部重点实验室	170	3382	30.0	48.0
3	黄小红	福建农林大学动物科学学院生物农药与化学生物学教育部重点实验室	58	436	12.0	18.0
4	关雄	福建农林大学动物科学学院生物农药与化学生物学教育部重点实验室	112	2066	21.0	43.0
5	王君	厦门大学生命科学学院教育部细胞生物学与肿瘤细胞工程重点实验室	12	129	7.0	11.0