棉铃虫中肠Bt毒素受体蛋白(APN)的分离与纯化

• 作者: 吴孔明 徐广 梁革梅 王桂荣 郭予元
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 棉铃虫 受体蛋白 刷状缘膜囊泡 氨肽酶N
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 102-107
• 页数: 6页
• 分类号: S4
• 字数: 4747字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2005.01.020

摘要

利用Mg/EGTA方法,以不同的速度进行离心,成功地分离了棉铃虫(Bacillus thuringiensis)中肠刷状缘膜囊泡(BBMV0,BBMV中保留了大部分氨肽酶N(aminopeptidase N,APN)活性,BBMV中APN的特异活性较粗匀浆液相比提高了3.29倍;CHAPS3-[(3-chlor-amidopropyl)dimethylammonio]-1-propane sulphonate可以增加BBMV的溶解,加入1%(CHAPS)之后APN特异活性增加至5.21倍;利用磷酸酰肌醇特异性的磷脂酶(PI-PLC)能将APN从膜上解离下来,BBMV经PI-PLC处理后,SDS-PAGE电泳结果仅有120 kD的1条带;Mono-Q和FPLC结合的方法可以纯化部分APN,SDS-PAGE电泳结果显示,经Mono-Q柱处理后的BBMV中分子量约100 kD的蛋白条带加粗;棉铃虫3个抗性品系与敏感品系相比,APN特异活性差异不显著,说明棉铃虫对Bt产生抗性与APN活性的变化无关,抗性的产生可能与Bt毒素和APN结合能力的改变有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁革梅	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	49	829	14.0	28.0
2	吴孔明	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	157	4324	38.0	57.0
3	郭予元	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	104	3382	36.0	54.0
4	徐广	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	16	432	12.0	16.0
5	王桂荣	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	48	755	14.0	27.0