载脂蛋白ApoE的原核表达以及与PrP蛋白间相互作用的初步研究

• 作者: 万言珍 周伟 姜慧英 张宝云 石琦 董小平 陈岚 陈建明 韩俊 高晨 高永军
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: 载脂蛋白ApoE 抗体 PrP蛋白 分子间相互作用
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 443-447
• 页数: 5页
• 分类号: R373|Q78
• 字数: 4409字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8721.2005.06.007

摘要

利用RT-PCR方法从人源细胞系SH-SY5Y cDNA中扩增出载脂蛋白ApoE基因,并在pET32a载体中表达融合蛋白His-ApoE,以纯化的融合蛋白免疫实验用兔获得特异性抗体,利用ELISA及免疫共沉淀方法对ApoE及PrP之间的相互作用进行研究.结果表明,SDS-PAGE显示表达的His-ApoE蛋白的相对分子量约为54 000,所制备的抗血清ELISA效价可达到1∶406 900,并能够有效地识别重组及动物组织中的内源性ApoE蛋白.ELISA和免疫共沉淀实验均显示,原核表达的ApoE可与全长的PrP蛋白(PrP23-231)在体外发生相互作用,其作用位点可能位于PrP蛋白的N端.这些结果为TSE经血传播的机制研究提供了新思路.