定量检测人表皮生长因子试剂盒的研制及应用

• 作者: 罗萍 邹全明
• 来源期刊: 中华检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 表皮生长因子 抗体 酶联免疫吸附测定
• 年，卷（期）: 2005,（9）
• 所属期刊栏目: 临床实验诊断研究
• 页码范围: 932-935
• 页数: 4页
• 分类号: R4
• 字数: 2892字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:1009-9158.2005.09.017

摘要

目的研制亲和素生物素酶联免疫吸附法(ABC ELISA)定量检测人表皮生长因子(EGF)试剂盒.方法以纯化的重组人表皮生长因子(rhEGF)为抗原,制备兔抗rhEGF多克隆抗体和鼠抗rhEGF 单克隆抗体(McAb),并鉴定其生物学特性.用生物素标记抗rhEGF McAb,建立ABC ELISA定量检测人EGF的方法,同时用该方法检测50名正常人和38例肿瘤病人血清EGF含量,并与YAS公司EGF ABC ELISA试剂盒(n=88)进行比对.结果本研究建立的ABC ELISA定量检测法的灵敏度为0.050 ng/ml,批内变异系数(CV)<4%,批间CV<6.3%,回收率95.7%～102.5%,特异性鉴定显示,与相关蛋白无交叉反应,同YAS公司同类试剂盒检测结果无差异(P>0.05).肿瘤病人血清EGF含量(0.426±0.084 ng/ml～0.456±0.095 ng/ml)比正常人(0.243±0.086ng/ml)明显增高(P<0.05).结论本研究成功制备的抗人EGF多克隆抗体和McAb特异性好,亲和力高;初步建立的ABC ELISA检测人EGF试剂盒与YAS公司同类试剂盒质量相当,适于推广应用.