双月安环己烷草酸铂对肝癌细胞DNA损伤修复基因表达影响及其机制

• 作者: Donald David YEN Yun ZHOU Bing-sen 李宏为 杨卫平 邱伟华 陈皓
• 来源期刊: 中华消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝细胞癌 双月安环己烷草酸铂 启动子
• 年，卷（期）: 2005,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 554-557
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 4047字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0254-1432.2005.09.011

摘要

目的初步明确肝癌细胞中特异性表达缺失的DNA损伤修复基因(GADD45β)近端启动子序列,并探索双月安环己烷草酸铂(Oxaliplatin)对人肝癌细胞HepG2中GADD45β基因表达影响及可能机制.方法以30～50个碱基间隔体外人工合成GADD45β近端启动子序列(-547至-436),分别插入pGL3 basic荧光素表达质粒的荧光素基因上游,以电穿孔法转染HepG2,根据启动子活性强度结合TRANSFAC数据库分析可能存在的转录调节因子结合位点;以Northern印迹和实时荧光定量PCR比较Oxaliplatin作用前后HepG2细胞GADD45β表达,并在此基础上进一步比较Oxaliplatin对GADD45β启动子活性的诱导作用.结果GADD45β近端启动子中含有E2F-1(-470/-436)和核因子(NF)-KB(-547/-520)转录调节因子与启动子结合位点,并可能存在"抑制区".Oxaliplatin能明显诱导HepG2中GADD45β表达,并呈剂量-效应正相关关系,同时Oxaliplatin能相应诱导E2F-1启动子活性.结论Oxaliplatin能明显诱导肝癌细胞中特异性缺失的GADD45β基因表达,增强转录调节因子E2F-1的表达水平是其可能的作用机制.