小鼠四倍体半克隆胚胎发育研究

• 作者: 丁晨晖 于洋 侯晓军 季维智 李雪梅 焦丽红 王二耀 王柳 赵春丽 陈欣洁
• 来源期刊: 科技导报
• 学科: 生物学
• 关键词: 四倍体 半克隆 胚胎发育 非整倍体
• 年，卷（期）: 2005,（8）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 56-60
• 页数: 5页
• 分类号: Q813
• 字数: 6834字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-7857.2005.08.014

摘要

半克隆(Semi-Cloned)胚胎是通过注射体细胞核到未去核的卵母细胞中产生的.在半克隆胚胎中,体细胞被用来作为精子的替代物.然而,由于异常的染色体分离,构建的半克隆胚胎在激活后形成了非整倍体而导致胚胎发育受到严重影响,不能发育到期.本研究通过抑制小鼠半克隆胚胎在激活过程中染色体数目减半,避免非整倍体胚胎形成,研究四倍体半克隆(Tetraploid Semi-cloned,TSC)胚胎的发育和体细胞核的掺入对胚胎发育的影响.结果显示,TSC胚胎的体外发育率显著高于二倍体半克隆胚胎,与正常受精卵及孤雌激活对照无显著性差异,但TSC胚胎的细胞数在桑椹胚和囊胚期比正常二倍体受精胚胎和孤雌激活胚胎少.通过Oct-4染色发现,TSC胚胎囊胚期内细胞团(InnerCell Mass,ICM)细胞很少或者没有.移植63个四倍体半克隆胚胎到3只假孕母鼠体内,得到20个胎盘,但没有得到胎儿.组蛋白乙酰化和DNA甲基化检测显示,部分TSC胚胎在囊胚期没有形成正常受精胚胎在ICM和滋养外胚层(Trophectoderm,TE)之间的差异分布.TSC胚胎的基因表达不依赖于细胞分裂次数而依赖于发育时间.虽然TSC胚胎避免了二倍体半克隆胚胎形成非整倍体现象,但由于TSC胚胎没有ICM细胞或ICM细胞很少,所以只能形成胎盘而不能形成胎儿.本实验第一次较为全面地研究了TSC胚胎的发育,同时也为研究体细胞核再程序化、基因打靶技术提供了一种新的途径.