抗G418小鼠胚胎干细胞饲养层的制备

• 作者: 张梅英 李华 杨葳 汪瑛 王太一 王禄增 秦英 董婉维
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 3T3细胞 G418抗性 饲养层 胚胎干细胞
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 1-3
• 页数: 3页
• 分类号: Q813.1
• 字数: 2531字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0258-4646.2005.01.001

摘要

目的:建立具有G418抗性的3T3细胞系,用于转染pTet-on基因的ES阳性克隆筛选的饲养层.方法:通过脂质体转染的方法,将含有neo基因的质粒pWL/neo导入3T3细胞中,利用G418的药物选择特性,对转染细胞进行压力筛选,并对其进行PCR鉴定.结果:经500μg/ml的G418压力筛选后,获得了抗G418细胞克隆.抗性3T3细胞的形态和生长速度与正常3T3细胞没有差异,用特异性核苷酸引物检测抗性细胞基因组DNA,可以扩增出对应的核苷酸片段,Southern blot鉴定结果表明neo基因片段已整合入G418抗生3T3细胞中.结论:成功地培育了G418抗性的3T3细胞,为进行pTet-on基因转染ES细胞的阳性细胞克隆筛选奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王禄增	中国医科大学实验动物部	73	713	14.0	23.0
2	董婉维	中国医科大学实验动物部	38	293	11.0	16.0
3	张梅英	中国医科大学实验动物部	41	186	7.0	12.0
4	王太一	中国医科大学实验动物部	30	279	9.0	16.0
5	杨葳	中国医科大学实验动物部	29	100	6.0	8.0
6	李华	中国医科大学实验动物部	56	397	12.0	18.0
7	汪瑛	中国医科大学实验动物部	4	31	3.0	4.0
8	秦英	中国医科大学实验动物部	12	74	5.0	8.0