白桦ISSR-PCR反应体系的优化

• 作者: 姜静 杨传平 潘华 魏志刚
• 来源期刊: 东北林业大学学报
• 关键词: 白桦 ISSR标记 反应体系
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 页码范围: 1-3
• 页数: 3页
• 分类号: S791.259
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-5382.2005.06.001

摘要

以白桦基因组DNA为模板,研究了ISSR的影响因素,建立一套适宜于白桦的ISSR优化反应体系及程序.即20μL反应体系中,Mg2+浓度范围为0.5～3.0 mmol·L-1,dNTPs浓度范围为0.10～0.30 mmol·L-1,Taq聚合酶浓度范围为1.0～2.0 U,模板DNA浓度为30～120 ng,同时含有RNA的模板DNA对ISSR扩增也略有影响,引物浓度范围为0.2～0.4 μmmol·L-1.通过梯度PCR测验,确定了适宜的退火温度为49℃.反应程序为:第一个循环基因组DNA经94℃预变性5 min;30个循环为94℃变性30 s,49℃退火30 s,72℃延伸30 s;最后一个循环完成后,在72℃延伸7min.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨传平		231	4191	35.0	51.0
2	姜静		93	2233	27.0	43.0
3	潘华		6	81	3.0	6.0
4	魏志刚		33	491	12.0	21.0