禽脑脊髓炎病毒Van Roekel株衣壳蛋白基因原核表达及其ELISA检测研究

• 作者: 孙明 张二芹 赵心力 赵振华 钱爱东 陈西钊
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 禽脑脊髓炎病毒 VP0、VP3、VP1基因 原核表达 ELISA
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 55-58
• 页数: 4页
• 分类号: S852.659.6|S858.3
• 字数: 2838字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2005.01.017

摘要

利用RT-PCR方法扩增了禽脑脊髓炎病毒VP0、VP3和VP1基因,分别插入pGEX-4T-1原核表达载体,转化到E.coli ER2566表达菌内,经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE分析表达产物.结果表明,表达的VP0、VP3、VP1融合蛋白分子量分别为53,53,56ku.以电洗脱法纯化VP0、VP3、VP1表达蛋白抗原并分别建立了间接ELISA方法,用阳性血清和阴性血清进行检测.结果显示,表达VP1蛋白反应活性相对高于VP0、VP3蛋白反应活性,最后再将自制VP1板用自配试剂检测其活性,同时用美国试剂盒检测VP1活性,美国ELISA试剂盒、琼脂扩散试验检测同样10份血清作比较,三组ELISA检测结果,其中有8份被检血清为阳性;2份被检血清为阴性.这一结果与琼脂扩散试验检测结果一致.说明VP1表达蛋白活性达到预期要求,可以用做AE的ELISA诊断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钱爱东		283	1216	15.0	21.0
2	孙明		19	131	7.0	10.0
3	陈西钊		22	220	8.0	14.0
4	张二芹		4	21	4.0	4.0