三氯乙烯诱发L-02肝细胞毒的双向电泳分析及质谱鉴定

• 作者: 刘建军 卫秦芝 庄志雄 徐新云 李习艺 杨晓华 黄海燕
• 来源期刊: 中华预防医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 三氯乙烯 电泳,凝胶,双向 蛋白质组
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 175-178
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3600字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0253-9624.2005.03.007

摘要

目的分析三氯乙烯对L-02肝细胞蛋白质表达的影响.方法利用噻唑蓝比色法和锥虫蓝拒染法,确定三氯乙烯的剂量-反应关系,建立L-02肝细胞染毒模型,提取细胞总蛋白,双向电泳分离蛋白质组成分,找出三氯乙烯处理后表达有差别的蛋白斑点,用基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱进行鉴定.结果当三氯乙烯浓度达到30 μmol/L时,L-02肝细胞增殖抑制率明显升高.选用40 μmol/L三氯乙烯染毒的L-02肝细胞及其对照细胞进行双向电泳,获得分辨率高、重复性好的电泳图谱.结果表明,三氯乙烯染毒的L-02肝细胞蛋白点表达量升高2倍以上的有37个,蛋白点减少至1/2以下的有15个.利用质谱技术对差异蛋白点进行鉴定,肽质量指纹图谱初步鉴定了4个蛋白,肽质量指纹图谱和串联质谱进一步确定了11个蛋白.结论三氯乙烯能引起L-02肝细胞蛋白表达改变.