一种高效、快速的大肠杆菌感受态细胞制备及质粒转化方法

• 作者: 何韶衡 李明才
• 来源期刊: 汕头大学医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 大肠杆菌 质粒 转化 感受态细胞
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 方法学
• 页码范围: 228-230,241
• 页数: 4页
• 分类号: Q78|R37
• 字数: 3084字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4716.2005.04.017

摘要

目的:建立一种高效、快速的大肠杆菌感受态细胞制备及质粒转化的方法.方法:质粒DNA加入感受态细胞,经短暂冰浴和热休克后,直接涂布预热至37℃的平板. 以大肠杆菌DH5α为受体菌,研究CaCl2溶液浓度、感受态细胞的存放时间、转化时间及转化后的培养时间等对质粒转化效率的影响.结果:以100 mmol/L CaCl2溶液制备感受态细胞,冰浴转化5 min,经42℃热休克作用90 s后直接涂平板筛选转化子,获得与常规转化方法相当的转化效率.CaCl2溶液浓度和感受态细胞的存放时间对转化效率有明显的影响,而转化时间和转化后的振荡培养时间对转化效率的影响不明显.结论:成功地建立了一种高效、快速的感受态细胞制备及质粒转化的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何韶衡	汕头大学医学院变态反应学与炎症学研究所	126	1181	16.0	27.0
2	李明才	汕头大学医学院变态反应学与炎症学研究所	29	234	8.0	14.0