摘要:
[目的]探讨应用胚胎干细胞联合羊膜移植治疗早期严重眼化学伤.[方法]将培养的表达绿色荧光蛋白的胚胎干细胞(ES-GFP细胞)接种于羊膜,5-溴脱氧尿嘧啶(Brdu)标记后对严重化学伤模型眼行胚胎干细胞羊膜移植,实验共分3组,对照组、单纯羊膜移植、羊膜+ES细胞移植组,每组12只12眼,通过荧光示踪、病理学、免疫组织化学等检查,观察胚胎干细胞的生长分化和移植治疗效果.[结果]ES-GFP细胞能贴附在羊膜上呈集落状生长,移植治疗术后第14天,角膜溃疡穿孔:对照组5眼、单纯羊膜移植2眼、羊膜+ES细胞移植组0眼,对照组和羊膜+ES细胞移植组比较,P=0.037<0.05;角膜新生血管和角膜混浊:对照组、单纯羊膜移植组和羊膜+ES细胞移植组得分分别为3.57±0.53,2.20±0.41,1.40±0.36,和3.72±0.49,2.8±0.42,2.25±0.45,羊膜+ES细胞移植组与对照组和单纯羊膜移植组比较P均<0.01;病理学等检查羊膜+ES细胞移植组:角膜表面羊膜呈均匀红染的纤维样结构,羊膜下多层上皮样细胞,角膜基质少量细胞浸润,新生血管少见,后弹力层轻度肿胀,上皮细胞AE-5染色阳性,细胞核内可见BrdU阳性颗粒,荧光显微镜检查角膜上皮层可见绿色荧光带.[结论]以羊膜为载体培养ES细胞,移植到早期严重眼化学伤的眼表,ES细胞诱导分化为角膜上皮样细胞.ES细胞联合羊膜移植能抑制角膜新生血管、减轻炎症反应、减少角膜溃疡穿孔.ES细胞联合羊膜移植可能为早期严重眼化学伤的临床治疗提供一条新途径.